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TissueFAXS Cytometry技術在黑色素細胞瘤的空間分布研究中的應用
趨化因子通過靶向腫瘤、基質和造血細胞來影響腫瘤的轉移。通過對人類原發性黑色素瘤樣本趨化因子mRNA表達譜的特征化，發現與瘦黑色素瘤(T1期)相比，CXCL5在T4期原發性黑色素瘤中顯著上調。
趨化因子CXCL5是CXC類趨化因子家族的一員，由多種細胞產生，具有很強的粒細胞趨化作用。CSCL5識別并與G蛋白偶聯受體CXCR2結合，通過細胞自分泌或非自分泌途徑行使生物學效應。
趨化因子除了在穩定狀態下的組織維穩或炎癥中發揮主要作用外，還在腫瘤生物學中發揮重要作用；之前研究表明，原發性腫瘤源性趨化因子能夠通過白細胞、內皮細胞或成纖維細胞的吸引來重塑局部環境的細胞組成。以往研究對單個趨化因子及其各自的致瘤效應進行了廣泛的分析，但對不同趨化因子的環境特異性、并行性數據的了解仍然很少。
黑色素瘤是一種高度惡性的皮膚腫瘤，主要通過淋巴系統發生淋巴結轉移。黑色素瘤能夠在體內和體外誘導淋巴管生成，淋巴管數量與轉移風險相關正相關。成功的淋巴轉移需要腫瘤細胞成功的遷移到淋巴管。初級黑色素瘤表達多種趨化因子和趨化因子受體，能夠誘導血管生成和吸引免疫細胞，但其中只有少數如CXCL 8(IL-8)、CXCL 1做了詳細的研究。
為了確定CXCL5在黑素瘤進展中的作用，使用CXCL5過表達的人類黑素瘤細胞建立了轉移小鼠異種移植模型。通過研究發現，CXCL5對黑素瘤的體外增殖和原發性腫瘤的體內生長均無影響，但在嚴重聯合免疫缺陷小鼠模型中，CXCL5過表達的腫瘤募集了大量中性粒細胞，并顯著增加了淋巴管生成。募集的中性粒細胞被發現于淋巴管附近或內部，經常直接接觸黑素瘤細胞。在臨床上，過表達CXCL5的黑色素瘤淋巴結轉移明顯增加。將這些發現于人類患者樣本對比，發現CXCL5表達、T4期原發性黑素瘤中性粒細胞數量與隨后局部區域轉移的發生之間存在正相關。
維也納醫學院的皮膚科教授Pro Loewe及他的團隊對此進行深入研究并發文于The Journal of Investigative Dermatology上。
(a)CXCL5ox和百分比（n=5，雙獨立實驗）；(b)CXCL5ox小鼠樣本中性粒細胞距離淋巴管距離(≤10,11-20,21-200µm,n=141,three tumor samples)
以上實驗部分應用奧地利TissueGnostics公司TissueFAXS Plus系統獲取免疫組化與免疫熒光影像，并利用StrataQuest軟件進行定量分析。計算anti-LY6G陽性腫瘤浸潤中性粒細胞的數量；精確識別腫瘤細胞與淋巴管的結構并對其相互關系空間位置分布進行深度分析。 StrataQuest 軟件不僅可以對單細胞進行識別，也可以對例如淋巴管類的特殊組織結構進行自動識別。
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